PESQUISA VETERINÁRIA BRASILEIRA

Abstract in English:

Mycoplasma hyopneumoniae is one of the most challenging respiratory pathogens involved with swine pneumonia worldwide, responsible for a chronic infection with high morbidity, which predisposes secondary bacterial infections in growing and finishing pigs. Advances in diagnostic techniques allowed identification of genetic characteristics associated with high antigenic and proteomic variability among bacterial strains. This study aimed to evaluate the genetic diversity of M. hyopneumoniae strains in lungs with pneumonic lesions obtained from 52 pig farms located in Minas Gerais, one of the largest swine production states in Brazil. Genotyping was performed using multilocus variable number of tandem repeat (VNTR) analysis (MLVA), targeting two loci encoding P97 and P146 adhesins VNTR. The results showed that this agent is widely disseminated in pig farms and there is a high polymorphism of M. hyopneumoniae variants circulating in the state of Minas Gerais. Different M. hyopneumoniae genotypes are randomly distributed in several regions of the state, with no specific geographic population structure pattern. M. hyopneumoniae association with viral agents was sporadic (3.17% with Influenza A and 1.9% with PCV2).

• Enzootic pneumonia MLVA genotyping swine respiratory complex Mycoplasma hyopneumoniae pigs

Abstract in Portuguese:

Mycoplasma hyopneumoniae é um dos patógenos respiratórios mais desafiadores envolvidos com pneumonia suína em todo o mundo. É responsável por uma infecção crônica de alta morbidade, que predispõe a infecções bacterianas secundárias nas fases de crescimento e terminação. Avanços nas técnicas diagnósticas permitiram a identificação de características genéticas do agente, associadas à alta variabilidade antigênica e proteômica entre cepas. Este estudo teve como objetivo examinar a ocorrência e diversidade genética de cepas de M. hyopneumoniae em pulmões com lesões pneumônicas em 52 granjas de suínos no estado de Minas Gerais, um dos maiores estados produtores de suínos do Brasil. A genotipagem foi realizada utilizando a técnica de “multilocus variable number of tandem repeat analysis” (VTNR/MLVA), usando dois loci que codificam VNTR das adesinas P97 e P146. Os resultados mostraram que esse agente está amplamente disseminado em granjas de suínos e que existe alto polimorfismo das variantes de M. hyopneumoniae circulando no estado de Minas Gerais. Diferentes genótipos de M. hyopneumoniae estão distribuídos aleatoriamente em várias regiões do estado, sem um padrão de estrutura populacional e geográfica específico. Associação de M. hyopneumoniae e agentes virais foi esporádica (3,17% com Influenza A e 1,9% com PCV2).

• Pneumonia enzoótica MLVA genotipagem complexo respiratório dos suínos Mycoplasma hyopneumoniae suínos

Abstract in English:

Porcine enzootic pneumonia (PES), mainly caused by the bacteria Mycoplasma hyopneumoniae, is the main cause of respiratory problems in pigs. Infection by M. hyopneumoniae leads to production losses and the predisposition of affected animals to secondary infections, which may result in the condemnation of carcasses and organs due to lung lesions at the time of slaughter. The objective of the research was to evaluate the infection by M. hyopneumoniae in pigs submitted to slaughter in São Luís Island/MA, using molecular and histopathological diagnostic methods. One hundred fifty lung samples were collected from inspected (n=65) and non-inspected (n=85) slaughter pigs on São Luís Island, Maranhão, from July 2019 to August 2021. Of the 150 DNA samples collected, 121 showed an amplified product for Cyt B in the PCR assay. Thus, 121 samples were submitted to qPCR of M. hyopneumoniae, of which 44 (36.36%) showed positive results. The mean amount of bacterial load ranged from 1.20 × 101 to 7.20 × 104, with a mean of 1.73 × 104 copies. Of the reagent samples, 81.81% (36 samples) were obtained from non-inspected slaughter, while 18.18% (8 samples) were obtained from slaughterhouses. In the histopathological analysis, 44 positive qPCR samples were evaluated, of which 28 (63.63%) presented results compatible with the main inflammatory process associated with the presence of M. hyopneumoniae, that is, bronchial-associated lymphoid tissue hyperplasia (BALT). Three samples that showed the highest bacterial load (qPCR: 5.63 × 10³, 2.19 × 104 and 7.23 × 104) showed more evident lesions in this study. The microscopic findings associated with the quantifications indicated a relationship between the amount of bacterial load and the presence of microscopic lesions; higher bacterial load in lung tissue is associated with increased histopathologic staining for BALT hyperplasia. In conclusion, the results point to the circulation of the etiological agent in the sampled animals and the need for preventive measures on pig farms in Maranhão with the involvement of producers, sanitary defense and inspection agencies.

• Mycoplasma hyopneumoniae swine enzootic pneumonia pig farming

Abstract in Portuguese:

A pneumonia enzoótica suína (PES), causada principalmente pela bactéria Mycoplasma hyopneumoniae, é a principal causa de problemas respiratórios em suínos. A infecção por M. hyopneumoniae leva a perdas produtivas e a predisposição dos animais acometidos a infecções secundárias, o que pode resultar em condenação de carcaças e órgãos por lesões pulmonares no momento do abate. O objetivo da pesquisa foi avaliar a infecção por M. hyopneumoniae em suínos submetidos ao abate na Ilha de São Luís, por meio de métodos diagnósticos moleculares e histopatológicos. Para isso, foram coletadas 150 amostras de pulmão de suínos de abate inspecionado (n=65) e não inspecionado (n=85) na Ilha de São Luís/Maranhão, no período de julho de 2019 a agosto de 2021. Das 150 amostras de DNA coletadas, 121 apresentaram produto amplificado para Cyt B no ensaio de PCR. Assim, 121 amostras foram submetidas à qPCR de M. hyopneumoniae, das quais 44 (36,36%) apresentaram resultados positivos. A quantidade média de carga bacteriana variou de 1,20 × 101 a 7,20 × 104, com média de 1,73 × 104 cópias. Das amostras reagentes, 81,81% (36 amostras) foram obtidas de abate não inspecionado, enquanto 18,18% (8 amostras) foram obtidas em abatedouro. Na análise histopatológica, foram avaliadas 44 amostras positivas para qPCR, das quais 28 (63,63%) apresentaram resultados compatíveis com o principal processo inflamatório associado à presença de M. hyopneumoniae, ou seja, hiperplasia do tecido linfóide associado ao brônquio (BALT). Três amostras que apresentaram maior carga bacteriana (qPCR: 5,63 × 10³, 2,19 × 104 e 7,23 × 104) foram mais evidentes neste estudo. Os achados microscópicos associados às quantificações indicaram uma relação entre a quantidade de carga bacteriana e a presença de lesão microscópica; a maior carga bacteriana no tecido pulmonar está associada a maior alteração histopatológica para hiperplasia BALT. Em conclusão, os resultados obtidos sinalizam para a circulação do agente etiológico nos animais amostrados e a necessidade de medidas preventivas nas criações de suínos do estado do Maranhão com envolvimento dos produtores, órgãos de defesa sanitária e inspeção.

• Mycoplasma hyopneumoniae Pneumonia Enzoótica Suína Suinocultura

Abstract in English:

ABSTRACT.- Irigoyen L.F., Van Alstine W, Turek j. & Clark L.K. 1998. Ultrastructural observation of the airways of recovered and susceptible pigs after inoculation with Mycoplasma hyopneumoniae. [Observação ultra-estrutural das vias aéreas de suínos recuperados e suscetíveis após inoculação com Mycoplasma hyopneumoniae.] Pesquisa Veterinária Brasileira 18(1):1-7. Depto Patologia, Universidade Federal de Santa Maria, Campus Camobi, Santa Maria, RS 97119-900, Brazil. To determine the morphological differences in the epithelium of the airways of recovered and susceptible pigs after Mycoplasma hyopneumoniae challenge, twenty-four 4-week-old M. hyopneumoniae-free pigs were intratracheally inoculated with 107ccu/ml of a pure low-passaged culture of the P5722-3 strain of M. hyopneumoniae challenge material. Eight pigs (group I) were challenged at the beginning of the experiment and rechallenged 3 months late 1: Group II pigs were also challenged at the beginning of the experiment and necropsied 3 months later: Group III pigs were challenged at the sarne time as the rechallenge of group I pigs. Eight nonchallenged pigs served as contrais (group IV). Three days after the second challenge of group I and the first challenge of group III, and every 3 and 4 days thereafter, two pigs from each group were euthanatized by electrocution and necropsied. Samples of bronchi and lung tissue were examined using light and electron microscopy (SEM and TEM). Macroscopic lesions were observed in the lungs of all group III pigs (average = 4.74%) and were characterized by purple-red areas of discoloration and increased firmness affecting the cranioventral aspect of the lungs. Macroscopic lesions of pneumonia in groups I and II were minimal (less than 1%). There were no gross lesions of pneumonia in contrai (group IV) pigs. Microscopic lesions were characterized by hyperplasia of the peribronchial lymphoid tissue and mild neutrophilic infiltrates in alveoli. Electron microscopy showed patchy areas with loss of cilia and presence of leukocytes and mycoplasmas in bronchi of susceptible pigs (group III). The bronchial epithelium of rechallenged (group I), recovered (group II), and control (group IV) pigs was ultrastructurally similar indicating recovery of the former two groups. Although mycoplasmas were seen among cilia, a second challenge on pigs of group I did not produce another episode of the disease nor did it enhance morphological changes, suggesting that those pigs could become carriers of M. hyopneumoniae.

• Mycoplasma hyopneumoniae enzootic pneumonia swine pneumonia enzoótica suíno.

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Irigoyen L.F., Van Alstine W, Turek j. & Clark L.K. 1998. Ultrastructural observation of the airways of recovered and susceptible pigs after inoculation with Mycoplasma hyopneumoniae. [Observação ultra-estrutural das vias aéreas de suínos recuperados e suscetíveis após inoculação com Mycoplasma hyopneumoniae.] Pesquisa Veterinária Brasileira 18(1):1-7. Depto Patologia, Universidade Federal de Santa Maria, Campus Camobi, Santa Maria, RS 97119-900, Brazil. Para determinar as diferenças morfológicas no epitélio das vias aéreas de suínos suscetíveis e recuperados da infecção por Mycoplasma hyopneumoniae, 24 leitões com 4 semanas de idade, livres de infecção por M. hyopneumoniae, foram inoculados intratraquealmente com material contendo 107ccu/ml de cultura pura da cepa P5722- 3 de M. hyopneumoniae. Oito leitões (grupo I) foram inoculados no início do experimento e reinoculados 3 meses mais tarde, após apresentarem a doença e terem se recuperado. Os oito leitões do grupo II foram também inoculados no início do experimento e necropsiados 3 meses depois. Os leitões do grupo III foram inoculados ao mesmo tempo da reinoculação dos leitões do grupo I. Oito leitões não inoculados serviram como controles (grupo IV). Três dias após a reinoculação dos leitões do grupo I e a inoculação do grupo III e, a partir disso, a cada 2 dias, dois leitões de cada grupo foram sacrificados e necropsiados. Segmentos de brônquios e pulmão foram examinados em microscopia ótica e microscopia eletrônica de transmissão e de varredura. Lesões macroscópicas foram observadas nos pulmões de todos os leitões do grupo III (média: 4.74% da superfície) e eram caracterizadas por áreas firmes e avermelhadas nas porções cranioventrais. Lesões macroscópicas semelhantes foram mínimas em pulmões de leitões dos grupos I e II (menos de 1%) e ausentes.no grupo IV. As lesões microscópicas consistiam de hiperplasia do tecido linfóide peribronquial e infiltrado neutrofilico leve nos alvéolos. Na microscopia eletrônica havia lesões focais no epitélio ciliado, caracterizadas por perda de cílios e descamação de células, e presença de leucócitos e micoplasmas nos brônquios de leitões suscetíveis (grupo III). O epitélio bronquial de leitões reinoculados (grupo I), recuperados (grupo II) e controles (grupo IV) era ultraestruturalmente similar, indicando recuperação nos primeiros dois grupos. Embora micoplasmas tenham sido observados entre cilios, uma segunda inoculação em leitões do grupo I não causou outro episódio da doença nem aumentou as alterações morfológicas nos brônquios, sugerindo que esses leitões podem se tornar portadores de micoplasmas.